沃特斯色譜柱常見問題與解決方法:
1.柱壓升高
原因:填料堵塞、樣品殘留或污染。
解決方法:反向沖洗色譜柱,或用適當(dāng)溶劑清洗;若柱壓持續(xù)升高,可能需要更換色譜柱。
2.峰形變寬或分裂
原因:填料損壞、污染或流動(dòng)相不合適。
解決方法:檢查流動(dòng)相組成,清洗或再生色譜柱。
3.保留時(shí)間變化
原因:固定相流失或污染。
解決方法:用純?nèi)軇_洗色譜柱,必要時(shí)進(jìn)行柱再生。
4.微生物滋生
原因:水相流動(dòng)相長(zhǎng)期存放導(dǎo)致霉菌生長(zhǎng)。
解決方法:添加防腐劑(如0.01%疊氮鈉),或定期用有機(jī)溶劑沖洗。
1.柱再生
根據(jù)柱型選擇適當(dāng)?shù)脑偕椒ǎ?/div>
反相柱:用純甲醇或乙腈沖洗,去除疏水性雜質(zhì)。
正相柱:用正己烷或異丙醇沖洗,去除親水性雜質(zhì)。
若柱效顯著下降,可嘗試用廠商推薦的再生程序(如高溫沖洗或酸堿處理)。
2.修復(fù)輕微污染
對(duì)于輕微污染的色譜柱,可用以下方法修復(fù):
反相柱:用甲醇-水(10:90)混合液沖洗。
正相柱:用氯仿或甲醇沖洗。
3.及時(shí)更換老化柱
若色譜柱性能嚴(yán)重下降(如峰形畸變、保留時(shí)間不穩(wěn)定等),建議更換新柱,避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
沃特斯色譜柱使用注意事項(xiàng):
1.嚴(yán)格遵守操作規(guī)范
避免超過色譜柱的最大耐壓、溫度或pH范圍。
進(jìn)樣前確保樣品清澈無顆粒。
2.記錄使用情況
記錄色譜柱的使用次數(shù)、流動(dòng)相組成、樣品類型等信息,便于追蹤性能變化。
3.定期維護(hù)
每月檢查色譜柱性能(如測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間和峰形),及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題。
